Hi ha altres mètodes per purificar els productes de PCR?
Hi ha altres mètodes per purificar els productes de PCR?

Vídeo: Hi ha altres mètodes per purificar els productes de PCR?

Vídeo: Hi ha altres mètodes per purificar els productes de PCR?
Vídeo: Top 11 Causes of Burning Feet & Peripheral Neuropathy [Instant FIX?] 2024, De novembre
Anonim

Per a aquelles aplicacions que ho requereixin PCR neteja o validació de PCR resultats, allà són dos mètodes generalment seguit: Producte de PCR aïllament mitjançant una columna i gel purificació d'un gel d'agarosa.

Aquí, quin tipus de cromatografia s'utilitza per purificar els productes de PCR?

Per purificar els productes de PCR, s'utilitza la cromatografia d'exclusió de mida. Això atrapa molècules petites com ara proteïnes, primers , i nucleòtids, mentre que les molècules grans com els productes de PCR són massa grans per entrar a les perles i passar per la columna als tubs de recollida.

A més, com es purifica l'ADN? Bàsicament, pots purificar teu ADN mostres lisant les teves mostres de cèl·lules i/o teixits mitjançant el procediment més adequat (pertorbació mecànica, tractament químic o digestió enzimàtica), aïllant els àcids nucleics dels seus contaminants i precipitant-los en una solució tampó adequada.

A més, per què purifiquem el producte de PCR?

Purificació d'ADN d'a PCR La reacció és normalment necessària per a l'ús aigües avall i facilita l'eliminació d'enzims, nucleòtids, cebadors i components tampó. Els mètodes utilitzats habitualment utilitzen columnes de spin que contenen una matriu de sílice a la qual l'ADN es pot unir selectivament en presència de sals caotròpiques.

Per què s'ha de netejar l'ADN?

Nosaltres net amunt ADN de solucions aquoses per eliminar sals tampó, enzims o altres substàncies que podrien afectar les aplicacions posteriors. Alguns exemples inclouen la reacció de PCR net amunt, net després de les digerides de restricció i net de genòmica o plasmidi ADN contaminat amb proteïnes/resultes cel·lulars.

Recomanat: