Quant costa transformar una lligadura?
Quant costa transformar una lligadura?

Vídeo: Quant costa transformar una lligadura?

Vídeo: Quant costa transformar una lligadura?
Vídeo: ¿La mujer sigue teniendo la menstruación tras una ligadura de trompas? 2024, De novembre
Anonim

Transformació . Afegiu-hi entre 1-5 µl lligadura barreja a cèl·lules competents per transformació . Estesa lligadura amb PEG provoca una baixada transformació eficiència (Ràpid Lligadura Kit). Es recomana l'electroporació per a construccions grans (>10.000 pb).

D'aquí, quant producte de lligadura necessito per a la transformació?

Transformació . Afegiu-hi entre 1-5 µl lligadura barreja a cèl·lules competents per transformació . Estesa lligadura amb PEG provoca una baixada transformació eficiència (Ràpid Lligadura Kit). Es recomana l'electroporació per a construccions grans (>10.000 pb).

Posteriorment, la pregunta és, què és la lligadura i la transformació? En un experiment de clonació típic, els investigadors introdueixen primer un tros d'ADN, com un gen, en un tros circular d'ADN anomenat plasmidi. Aquest pas utilitza enzims de restricció i ADN lligasa i s'anomena a lligadura . Després d'a lligadura , el següent pas és transferir l'ADN a bacteris en un procés anomenat transformació.

Posteriorment, també es pot preguntar, quant d'ADN es necessita per a una lligadura?

La concentració global de vector + insert hauria d'estar entre 1-10 μg/ml per a una eficiència lligadura . Vector: Es recomana inserir proporcions molars entre 1:1 i 1:10 (1:3 és típic). Si no esteu segur del vostre ADN concentracions, realitzeu múltiples lligacions amb proporcions variables.

Quant de temps es pot emmagatzemar una reacció de lligadura?

Les lligadures poden es farà a temperatura ambient o més fresc (penseu entre 12 i 16 °C) durant la nit o fins i tot durant uns dies, si tu estàs molt ocupat. Tu pots també emmagatzemar una lligadura a la nevera i treure'l més tard per continuar lligant a temperatura ambient per com llarg segons sigui necessari.

Recomanat: