Taula de continguts:

Com es troba la concentració d'ADN a partir de l'absorbància?
Com es troba la concentració d'ADN a partir de l'absorbància?

Vídeo: Com es troba la concentració d'ADN a partir de l'absorbància?

Vídeo: Com es troba la concentració d'ADN a partir de l'absorbància?
Vídeo: Ejercicio 3: Encontrar el ADN y los aminoácidos a partir del ARNm. 2024, De novembre
Anonim

Concentració d'ADN s'estima mesurant el absorbància a 260 nm, ajustant l'A260 mesura de la terbolesa (mesurada per absorbància a 320 nm), multiplicant pel factor de dilució i utilitzant la relació que un A260 d'1,0 = 50 µg/ml dsDNA pur.

Així mateix, la gent es pregunta, com trobes la concentració d'ADN?

Per determinar la concentració d'ADN a la mostra original, feu el càlcul següent:

  1. Concentració dsDNA = 50 μg/mL × OD260 × factor de dilució.
  2. Concentració dsDNA = 50 μg/mL × 0,65 × 50.
  3. Concentració dsDNA = 1,63 mg/mL.

A més, quina és una bona concentració d'ADN? A bo qualitat ADN La mostra ha de tenir una A260/A280 relació d'1,7-2,0 i una A260/A230 proporció superior a 1,5, però com que la sensibilitat de les diferents tècniques a aquests contaminants varia, aquests valors només s'han de prendre com a guia de la puresa de la mostra.

D'aquesta manera, l'ADN absorbeix a 280 nm?

La relació d'absorbància a 260 nm vs 280 nm és s'utilitza habitualment per avaluar ADN contaminació de solucions de proteïnes, ja que les proteïnes (en particular, els aminoàcids aromàtics) absorbir llum a 280 nm.

Com s'utilitza NanoDrop per a la concentració d'ADN?

Bàsicament el nanogota us ofereix l'opció de seleccionar ADN , ARN, proteïnes. Heu de seleccionar ADN , a continuació, col·loqueu 2 μL d'aigua (mili Q preferit) seleccioneu "Blank" després d'això col·loqueu altres 2 μL d'aigua per confirmar que la mesura és 0. A continuació, col·loqueu 2 μL de la vostra mostra. Obtindreu la mesura.

Recomanat: